微生物環(huán)境衛(wèi)生的檢測(cè)
一、 消毒液藥效的微生物學(xué)鑒定法
1采樣對(duì)象：正常使用的消毒液，和已知配制好備用的消毒液
2采樣及檢驗(yàn)方法
在無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管吸取1毫升樣液，加入9毫升稀釋液中混勻，對(duì)于醇類(lèi)與酚類(lèi)消毒劑，稀釋液用普通營(yíng)養(yǎng)肉湯即可;對(duì)于含氯消毒劑、含碘消毒劑，需在肉湯中加入0.1%硫代硫酸鈉，對(duì)洗必泰、季銨鹽類(lèi)消毒劑，需在肉湯中加入3%(W/V)土溫80和0.3%卵磷脂;對(duì)醛類(lèi)消毒劑，需在肉湯中加入0.3%苷氨酸;對(duì)于含有表面活性劑的各種復(fù)方消毒劑，需在肉湯中加入(W/V)土溫80，以中和被檢樣液中的殘效作用，
將注入了樣液的稀釋液充分搖勻，取1毫升注入平皿，隨之倒入普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂，待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平皿，將平皿于37℃條件下培養(yǎng)24小時(shí)后計(jì)平板上生長(zhǎng)的菌落數(shù)。
3結(jié)果分析
平板上有菌生長(zhǎng)，表明被檢樣液中有殘存活菌，若每個(gè)平板菌落數(shù)在10個(gè)以下，仍可用于消毒，若每個(gè)平板菌落數(shù)超過(guò)10個(gè)，說(shuō)明每毫升被檢樣液含菌量已超過(guò)100個(gè)，即不宜在用于消毒。
該公式是一個(gè)經(jīng)驗(yàn)公式.它的理論模式依據(jù)是:100CM2的面積上10MIN降落的菌落數(shù),
等于1升空氣中所含的細(xì)菌總數(shù).系數(shù)50000基于上述假說(shuō)和單位換算而來(lái).
細(xì)菌總數(shù)(CFU/M3)=5/10T*100/A*1000*N=50000*N/AT
5/10T:實(shí)際放置了5MIN;
100/A:A單一培養(yǎng)皿面積;
1000:1M3=1000L啊,換算成m3
1、空氣細(xì)菌落菌數(shù)單位既然是cfu/m3，那采樣時(shí)應(yīng)該還要記錄放置平皿的高度。
2、食品安全管理體系中罐頭行業(yè)有個(gè)標(biāo)準(zhǔn)如下：
落下菌數(shù) 空氣污染程度 評(píng)價(jià)
30以下 清潔 安全
30～50 中等清潔
50～70 低等清潔 應(yīng)加注意
70～100 高度污染 對(duì)空氣要進(jìn)行消毒
100以上 嚴(yán)重污染 禁止加工
二、人員手表面細(xì)菌污染情況的檢驗(yàn)
1. 采樣方法：用一支蘸有無(wú)菌生理鹽水的棉拭子涂擦被檢對(duì)象手的全部，反復(fù)兩次，涂擦的時(shí)候棉拭子要相應(yīng)地轉(zhuǎn)動(dòng)，擦完后，將手接觸部分剪去，將棉拭子放入裝有10毫升無(wú)菌生理鹽水的試管內(nèi)送檢培養(yǎng)。
2. 檢驗(yàn)方法：同工器具表面細(xì)菌總數(shù)檢驗(yàn)方法。
3. 結(jié)果計(jì)算：每只手表面的細(xì)菌總數(shù)(cfu/只手)=平皿上菌落的平均數(shù)× 樣液稀釋倍數(shù)
三、設(shè)備的采樣與檢驗(yàn)方法
根據(jù)生物試劑過(guò)程所要求的重點(diǎn)衛(wèi)生部位，實(shí)驗(yàn)室對(duì)其進(jìn)行涂抹采樣，進(jìn)行細(xì)菌總數(shù)檢驗(yàn)。
1采樣方法
1.1涂抹法(適用于表面平坦的設(shè)備和工器具產(chǎn)品接觸面)
取經(jīng)過(guò)滅菌的鋁片框(框內(nèi)面積為50平方厘米)放在需檢查的部位上，用無(wú)菌棉球蘸上無(wú)菌生理鹽水擦拭鋁片中間方框部分，擦完后立即將棉球投入盛有10毫升無(wú)菌生理鹽水的試管中，此液每毫升代表5平方厘米。
1.2貼紙法(適用于表面不平坦的設(shè)備和工器具接處面)
將無(wú)菌規(guī)格紙(5×5厘米，紙質(zhì)要薄而軟)用無(wú)菌生理鹽水泡濕后，于需測(cè)部分分別貼上兩張，兩張紙面積共50平方厘米，然后取下放入盛有10毫升無(wú)菌生理鹽水的試管中，此液每毫升代表5平方厘米。
2檢驗(yàn)方法
2.1細(xì)菌總數(shù)的檢驗(yàn)
將上述樣液充分振搖，根據(jù)衛(wèi)生情況，相應(yīng)地做10倍遞增稀釋?zhuān)x擇其中2-3個(gè)合適的稀釋度作平皿傾注培養(yǎng)，培養(yǎng)基用普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂，每個(gè)稀釋度作2個(gè)平皿，每個(gè)平皿注入1毫升樣液，于37℃培養(yǎng)24小時(shí)后計(jì)菌落數(shù)。
結(jié)果計(jì)算
表面細(xì)菌總數(shù)(cfu/cm2)=平皿上菌落的平均數(shù)×樣液稀釋倍數(shù)/30×2
2.2致病菌的檢驗(yàn)
沙門(mén)氏菌，參照GB4789.4進(jìn)行
金黃色葡球菌，參照GB7918.5進(jìn)行
4.檢驗(yàn)合格標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌總數(shù)10-100個(gè)∕cm2，
5.關(guān)鍵點(diǎn)：細(xì)菌總數(shù)≤10個(gè)∕cm2
一般區(qū)域：細(xì)菌總數(shù)≤100個(gè)∕cm2
四、空氣采樣及檢驗(yàn)方法
1培養(yǎng)基：普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板，按GB4789.28中3.7條配制
2采樣(空氣沉降法)
2.1布點(diǎn)：面積小于30平方米的車(chē)間，設(shè)一對(duì)角線(xiàn)，在線(xiàn)上取3點(diǎn)，即中心一點(diǎn)，兩端在距墻1米處各取一點(diǎn);面積大于30平方米的車(chē)間，設(shè)東、西、南、北、中5個(gè)點(diǎn)，其中東、西、南、北點(diǎn)均距墻1米。
2.2采樣高度：與地面垂直高度80-150厘米。
2.3采樣方法;用直徑為9厘米的普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板在采樣點(diǎn)上暴露20分鐘蓋上送檢培養(yǎng)。
3培養(yǎng)：于37℃培養(yǎng)24小時(shí)。
4檢測(cè)頻率：每周
空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：
生車(chē)間、熟車(chē)間、成品車(chē)間：低于100個(gè);半成品庫(kù)、成品庫(kù)：低于10個(gè).
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