培養(yǎng)霉菌斜面轉(zhuǎn)接
如何讓霉菌產(chǎn)孢子？
一般微生物都會在逆境下產(chǎn)孢子，比如低溫、紫外照射等惡劣的生存條件，有的情況下，陽光照射也能促使產(chǎn)孢。不同的菌的產(chǎn)孢條件還不太一樣，要因菌而異，和培養(yǎng)基也有關(guān)。可以找找相關(guān)資料查查產(chǎn)孢培養(yǎng)基，可以試試水瓊脂培養(yǎng)基（直接在水中加瓊脂、無其他營養(yǎng)物質(zhì)）。
操作步驟：
一、開箱檢查:
打開包裝箱，查看斜面是否破損，菌株編號與說明書是否一致。
二、實驗準(zhǔn)備:
仔細(xì)閱讀菌株說明書，準(zhǔn)備2個新鮮平板或斜面。
三、器材滅菌:
斜面試管表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，管口灼燒滅菌冷卻備用。接種鋤和接種鏟在酒精燈外焰翻轉(zhuǎn)灼燒滅菌3-5分鐘，冷卻備用，冷卻后用接種鋤在斜面上相距0.5cm處切兩條平行線（與試管垂直）。
四、切分斜面:
換接種鏟在兩條平行線之間相距0.5cm處切兩條平行線（與試管平行），形成0.5cm*0.5cm的小正方形菌塊。
五、霉菌轉(zhuǎn)接:
用接種鏟挑取菌塊平放到平板或斜面（固體瓊脂表面）上（菌塊正面朝上）。轉(zhuǎn)接多個平板或斜面，重復(fù)以上操作即可。
六、完成培養(yǎng):
平板正放，斜面傾斜放置于霉菌培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（參照菌種說明書上的培養(yǎng)條件設(shè)置溫度）
（1） 實驗材料
根霉，毛霉，黑曲霉，青霉，土豆瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)皿，載玻片，蓋玻片，鑷子，顯微鏡，小刀，U形管等。
（2） 實驗步驟
1、配置培養(yǎng)基：根據(jù)原料用量配置土豆培養(yǎng)基。配置時，先急火煮沸，在溫火加熱20min，若有渾濁出現(xiàn)，則需過濾，然后定容。包扎土豆培養(yǎng)基，甘油等其他用品。滅菌后取出備用2、培養(yǎng)小室準(zhǔn)備及滅菌 在培養(yǎng)皿底部鋪一張略小于皿底的圓形濾紙片，濾紙片上依次放上“U”形載玻片擱架、載玻片、蓋玻片-四片，蓋上皿蓋，牛皮紙包扎，于恒溫干燥箱中121℃滅菌30min烘干備用；
2、瓊脂薄片制作：
a) 將稍微冷卻的培養(yǎng)基，倒在培養(yǎng)皿 中，做成薄平板。培養(yǎng)基應(yīng)該要倒 得薄而均勻。注意無菌操作。
b) 用解剖刀將瓊脂薄平板切成邊長不大于1cm的瓊脂薄片
c) 用解剖刀將瓊脂薄片移至小室載玻片上（一個載玻片上方兩塊薄片）
3、取菌接種：用接種環(huán)挑取少量待觀察的霉菌孢子（霉菌菌種的表面輕輕刮取即可），接種于固體培養(yǎng)基邊緣，以便于霉菌生長。接種時只要將帶菌的接種環(huán)在載玻片上輕輕碰幾下即可。接種量要少，以免培養(yǎng)后菌絲過于稠密而影響觀察。
4、加蓋玻片：用無菌鑷子將皿內(nèi)的蓋玻片蓋在瓊脂薄層上，用鑷子輕壓蓋玻片，使蓋玻片和載玻片之間的距離相當(dāng)接近，但不能壓扁。蓋玻片不能緊貼載玻片，要彼此留有小縫隙，一是為了通氣，二是使各部分結(jié)構(gòu)平行排列，易于觀察。
5、倒保濕劑：每皿倒入約2-3mL 20%的經(jīng)滅菌處理的甘油，使皿內(nèi)濾紙*濕潤，以保持皿內(nèi)濕度，蓋上皿蓋。制成載玻片濕室。
6、正置培養(yǎng)：將平皿置于27℃霉菌培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一周。
7、觀察： 將培養(yǎng)好的載玻片取出，置于顯微鏡下直接觀察。
（3）實驗結(jié)果及分析
實驗結(jié)果
1.根霉：菌絲無隔，有假根、匍匐菌絲。假根著生處有向上直立的孢囊梗，其頂端膨大成孢子囊，底部為半球形囊軸。
2.毛霉：孢囊梗直接由菌絲出，頂端為球形孢子囊
3.黑曲霉：菌絲有隔，氣生菌絲分化為分生孢子梗（無隔），頂端 膨脹為球狀頂囊。
4.青霉：菌絲有隔，分生孢子梗頂端不膨大，無頂囊，多次分枝成幾輪小梗，小梗頂端長孢子。分生孢子梗呈掃帚狀。
上一篇 : 教你如何使用高效液相色譜儀
下一篇 : 如何產(chǎn)生霉菌
在線咨詢