1024中文字幕 I 国产精品美女久久久久 I 91在线蜜桃臀 I 天天夜夜草 I 久久露脸国产精品 I 欧美zzoo I 一区二区中文在线 I 致单身男女免费观看完整版 I 国产在线露脸 I 免费人成无码大片在线观看 I 欧美日韩美女视频 I 91麻豆免费观看 I 91美女精品 I 91精品国产91久久久久久不卡 I 57pao国产一区二区 I 午夜一级片 I 99久热在线精品996热是什么 I 人妻熟妇乱又伦精品视频app I 黄色网络在线观看 I 国产成人在线播放 I 国产98色在线 I 日本在线高清视频 I 红桃视频亚洲 I 97国产免费 I 国产高清小视频 I 在线观看免费日本视频 I 亚洲精品久久一区二区三区777 I 一区二区中文视频

步驟如下：

　　（1）將切片漂浮于能經受高壓滅菌的器皿中。0.1mol/l PBS pH7.2沖洗3×5min。
　　（2）0.1mol/L苷氨酸PBS沖洗5min。
　　（3）0.4% Triton X-100 PBS 15min。
　　（4）1μg./ml蛋白酶k（0.1mol/l Tris –HCl pH8.0, 50mmol/L EDTA 配），37℃保溫30min。
　　（5）4%多聚甲醛PBs 5min。
　　（6）PBS沖洗2×min。
　　（7）0.25%乙酸酐（0.1mol/L三乙醇胺配）10min。
　　（8）2×SSC沖洗10min。
　　（9）將切片用滅菌吸水紙吸干，然后入雜交液。核酸探針濃度為0.25～0.5μg./ml。每一正常成年大鼠腦冠狀切片15μl雜交液足夠。43℃保溫12～16h。
　　（10）4×SSc 37℃沖洗30min。
　　（11）2×SSC（含RNAsea 20μg/ml）37℃保溫30min。
　　（12）1×SSC和0.5×SSc 37℃分別沖洗30min。
　　（13）0.05mol/l PBS沖洗3×5min。
　　（14）0.5%H2O2 PBS室溫20min。
　　（15）0.05mol/l PBS 沖洗2×5min。
　　（16）堿性酶標記抗體（Fab）與抗蛋白或多肽等抗體混合液，前者一般1：1000稀釋，后者則因抗體而異。稀釋液：1%BSA，0.4%Triton X-100 ,0.05mol/L PBS pH7.2，4℃孵育24h。
　　（17）0.05mol/l PBS沖洗4×5min。
　　（18）二抗（1：100～1：200）37℃保溫1h。
　　（19）0.05mol/l PBS沖洗3×5min。
　　（20）PAP（1：200～1：400）37℃保溫1h。
　　（21）0.05mol/l PBS沖洗3×5min。
　　（22）DAB顯色液（0.05%DAB + 0.03% H2O2,0.05mol/L PBS pH7.2配）顯色5～10min。
　　（23）0.05mol/l PBS沖洗3×5min。
　　（24）TSM，沖洗2×5min（TSM1：0.1mol/l Tris – HCl pH8.0,0.1mol/L NaCl,0.01mol/L MgCl2）.
　　（25）硝基四氮唑藍（400μg/ml）和5-溴-4-3-吲哚（200μg/ml）混合液（TSM2配顯色混合液）顯色1～3h，避光。
　　（26）20mmol/l EDTA終止顯色。
　　（27）將切片貼于涂有鉻礬明膠的載片上，空氣干燥。
　　（28）梯度酒精脫水，透明、封片。

elisa試劑盒，進口elisa試劑盒，放射免疫試劑盒，amresco，Gibco培養(yǎng)基-南京信帆生物技術有限公司